Приложение 9
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ
Смесь Никифорова. Абсолютный этиловый спирт смешивают с сернистым эфиром в соотношении 1:1. Смесь желательно использовать свежей. Хранить в холодильнике.
3%-й раствор хлорида натрия. В 500 мл дистиллированной воды развести 18 таблеток сухого хлорида натрия (одна таблетка - 830 мг).
0,04 % раствор аммиака. Приготовить можно следующими способами:
а) 1,6 мл 25 %-ного концентрированного (удельный вес 0,91) раствора аммиака доводят дистиллированной водой до 1000 мл;
б) 4 мл 10 %-ного раствора аммиака доводят дистиллированной водой до 1000 мл;
в) 2 мл 10 %-ного раствора аммиака доводят дистиллированной водой до 500 мл.
Раствор не меняет своей оптической плотности в течение 4 суток при условии его хранения в закупоренной пробирке в холодильнике при температуре 1-6°С. если раствор хранить при комнатной температуре, то через сутки появляются колонии бактерий, которые резко увеличивают его оптическую плотность и делают непригодным для исследования.
Материал для работа ╧15
Растворы.
Электродный буфер - веронал-мединаловый, рН 8,6. Состав буфера:
1) 5,5-диэтилбарбитуровая кислота - 1,84г/л;
2) натриевая соль 5,5-диэтилбарбитуровая кислота - 10,27 г/л. Реактивы растворяют в дистиллированной воде при постоянном перемешивании и нагревании приблизительно до температуры 50°С, после остывания доводят в мерной колбе до 1 л. Стабилен до 2 мес. При комнатной температуре и более при температуре 2-8°С. Приготовленным раствором можно пользоваться до 6 мес.
Раствор красителя пунцового "С" готовят на 3% растворах трихлоруксусной кислоты (ТХУ) и сульфосалициловой кислоты, которые являются фиксирующими агентами. Концентрация красителя 3 г/л. Хранят в посуде из темного стекла, годен для многократного использования.
3) Отмывающий раствор: 5-7% раствор уксусной кислоты.
Оборудование. Прибор для электрофореза; аппликатор; сосуд для сыворотки; ванночки для отмывания мембран из ацетатцеллюлозы; фильтровальная бумага.