Лабораторная работа № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ЭРИТРОЦИТОВ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ

В настоящее время наибольшее распространение получили два метода определения концентрации эритроцитов в крови. Первый из них - фотоэлектроколориметрический. Этот метод применяется при больших объемах исследований.

Ход работы: Соблюдая правила взятия крови, набрать микродозатором 0,01 мл крови и смешать с 12 мл 3%-ного р-ра хлорида натрия. Осторожно перемешать. Определить оптическую плотность полученной суспензии эритроцитов при помощи ФЭКа против контрольного 3%-ного р-ра хлорида натрия при зеленом светофильтре.

Перевод оптической плотности в абсолютные значения производят при помощи графика, который строится следующим способом: из всей партии выбирают 3 пробы с минимальной, средней и максимальной оптической плотностью, при помощи камеры Горяева определяют фактическую концентрацию эритроцитов в каждой из них. Далее на миллиметровой бумаге строят график зависимости оптической плотности от концентрации эритроцитов.

Второй метод - в камере Горяева. Этот метод является более точным и применяется при небольших объемах исследований.

Ход работы: Соблюдая правила взятия крови, набрать микродозатором 0,01 мл крови и смешать с 4 мл 3%-ного р-ра хлорида натрия. Осторожно перемешать и полученную суспензию вносят под притертое к камере Горяева покровное стекло. Подсчет эритроцитов ведут в пяти больших квадратах по диагонали сетки. Концентрацию рассчитывают по формуле 1:

Er = ∑Er х 4000 х 400 / 80,           (1)

где Er - концентрация эритроцитов в пробе,

          ∑Er - сумма эритроцитов, подсчитанных в пяти квадратах,

         400 - степень разведения.

Записать результат и сделать вывод о соответствии норме полученного показателя, используя данные приложения 3.